技術(shù)服務(wù)部
Technical Service Department


檢測(cè)原理
本試劑盒利用微滴式數(shù)字PCR技術(shù)結(jié)合熒光探針技術(shù),對(duì)EGFR基因突變進(jìn)行檢測(cè)。微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)(ddPCR)在傳統(tǒng)的PCR擴(kuò)增前對(duì)樣品進(jìn)行微滴化處理,即將含有核酸分子的反應(yīng)體系分成上萬(wàn)個(gè)納升級(jí)的微滴,其中每個(gè)微滴或不含有帶有目標(biāo)基因突變的DNA片段,或者含有一個(gè)至數(shù)個(gè)帶有目標(biāo)基因突變的DNA片段。經(jīng)PCR擴(kuò)增后,逐個(gè)對(duì)每個(gè)微滴進(jìn)行檢測(cè),有熒光信號(hào)的微滴判讀為1,沒有熒光信號(hào)的微滴判讀為0。根據(jù)泊松分布原理,參考陽(yáng)性微滴的個(gè)數(shù)與比例即可得出所要檢測(cè)的目標(biāo)基因(突變)的起始拷貝數(shù)或濃度。
檢測(cè)流程

技術(shù)優(yōu)勢(shì)
實(shí)驗(yàn)結(jié)果不再依賴于Ct值,直接給出DNA的起始濃度(copies/ul),實(shí)現(xiàn)真正意義上的絕對(duì)定量。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷有和無(wú)兩種擴(kuò)增狀態(tài),不依賴于擴(kuò)增效率,對(duì)PCR反應(yīng)抑制物的耐受能力明顯提高。
反應(yīng)體系微滴化可以極大的降低與目標(biāo)序列有競(jìng)爭(zhēng)性作用的背景序列濃度,因此特別適合在復(fù)雜背景中檢測(cè)稀有突變(≥0.1%)、區(qū)分微小差異(≥1.1倍)。
樣本類型
適用樣本為血漿樣本或組織樣本。
檢測(cè)結(jié)果示意圖
基因 | 位點(diǎn) | 2D圖-突變型(陽(yáng)性) |
EGFR | L747_T751delinsP |
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適應(yīng)癥: 非小細(xì)胞肺癌
本試劑僅限科研使用