檢測原理

本試劑盒利用微滴式數(shù)字PCR技術(shù)結(jié)合熒光探針技術(shù)，對KRAS基因突變進行檢測。微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)（ddPCR）在傳統(tǒng)的PCR擴增前對樣品進行微滴化處理，即將含有核酸分子的反應(yīng)體系分成上萬個納升級的微滴，其中每個微滴或不含有帶有目標基因突變的DNA片段，或者含有一個至數(shù)個帶有目標基因突變的DNA片段。經(jīng)PCR擴增后，逐個對每個微滴進行檢測，有熒光信號的微滴判讀為1，沒有熒光信號的微滴判讀為0。根據(jù)泊松分布原理，參考陽性微滴的個數(shù)與比例即可得出所要檢測的目標基因（突變）的起始拷貝數(shù)或濃度。

檢測流程

技術(shù)優(yōu)勢

Ÿ   實驗結(jié)果不再依賴于Ct值，直接給出DNA的起始濃度（copies/ul），實現(xiàn)真正意義上的絕對定量。

Ÿ   實驗結(jié)果判斷有和無兩種擴增狀態(tài)，不依賴于擴增效率，對PCR反應(yīng)抑制物的耐受能力明顯提高。

Ÿ   反應(yīng)體系微滴化可以極大的降低與目標序列有競爭性作用的背景序列濃度，因此特別適合在復(fù)雜背景中檢測稀有突變（≥0.1%）、區(qū)分微小差異（≥1.1倍）。

樣本類型

適用樣本為血漿樣本或組織樣本。

檢測結(jié)果示意圖

適應(yīng)癥:   結(jié)直腸癌 、肺癌 、黑色素瘤、多發(fā)性骨髓瘤、卵巢癌、甲狀腺癌

推薦用藥：  瑞戈非尼　Selumetinib (AZD6244)      舒尼替尼　 維莫非尼　

本試劑僅限科研使用