檢測(cè)原理

本試劑盒利用微滴式數(shù)字PCR技術(shù)結(jié)合熒光探針技術(shù)，對(duì)NRAS基因突變進(jìn)行檢測(cè)。微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)（ddPCR）在傳統(tǒng)的PCR擴(kuò)增前對(duì)樣品進(jìn)行微滴化處理，即將含有核酸分子的反應(yīng)體系分成上萬個(gè)納升級(jí)的微滴，其中每個(gè)微滴或不含有帶有目標(biāo)基因突變的DNA片段，或者含有一個(gè)至數(shù)個(gè)帶有目標(biāo)基因突變的DNA片段。經(jīng)PCR擴(kuò)增后，逐個(gè)對(duì)每個(gè)微滴進(jìn)行檢測(cè)，有熒光信號(hào)的微滴判讀為1，沒有熒光信號(hào)的微滴判讀為0。根據(jù)泊松分布原理，參考陽性微滴的個(gè)數(shù)與比例即可得出所要檢測(cè)的目標(biāo)基因（突變）的起始拷貝數(shù)或濃度。

檢測(cè)流程

技術(shù)優(yōu)勢(shì)

Ÿ   實(shí)驗(yàn)結(jié)果不再依賴于Ct值，直接給出DNA的起始濃度（copies/ul），實(shí)現(xiàn)真正意義上的絕對(duì)定量。

Ÿ   實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷有和無兩種擴(kuò)增狀態(tài)，不依賴于擴(kuò)增效率，對(duì)PCR反應(yīng)抑制物的耐受能力明顯提高。

Ÿ   反應(yīng)體系微滴化可以極大的降低與目標(biāo)序列有競(jìng)爭(zhēng)性作用的背景序列濃度，因此特別適合在復(fù)雜背景中檢測(cè)稀有突變（≥0.1%）、區(qū)分微小差異（≥1.1倍）。

樣本類型

適用樣本為血漿樣本或組織樣本。

檢測(cè)結(jié)果示意圖

適應(yīng)癥:    結(jié)直腸癌、非小細(xì)胞肺癌、黑色素瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、皮膚黑色素瘤

推薦用藥：   西妥昔單抗　 厄洛替尼　 依維莫司　 Selumetinib (AZD6244) 曲美替尼　 維莫非尼

本試劑僅限科研使用