檢測原理

本試劑盒利用微滴式數(shù)字PCR技術(shù)結(jié)合熒光探針技術(shù)，對融合基因EML4-ALK(E6; A20)進行檢測。微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)（ddPCR）在傳統(tǒng)的PCR擴增前對樣品進行微滴化處理，即將含有核酸分子的反應(yīng)體系分成上萬個納升級的微滴，其中每個微滴或不含有帶有目標(biāo)基因突變的DNA片段，或者含有一個至數(shù)個帶有目標(biāo)基因突變的DNA片段。經(jīng)PCR擴增后，逐個對每個微滴進行檢測，有熒光信號的微滴判讀為1，沒有熒光信號的微滴判讀為0。根據(jù)泊松分布原理，進行統(tǒng)計分析。本試劑盒含有內(nèi)參基因，可控制整個檢測過程，排除RNA質(zhì)量差，逆轉(zhuǎn)錄抑制劑，PCR反應(yīng)抑制劑等造成實驗失敗的因素，內(nèi)參基因使用VIC熒光標(biāo)記，融合基因使用FAM熒光標(biāo)記。

檢測流程

技術(shù)優(yōu)勢

Ÿ   實驗結(jié)果不再依賴于Ct值，直接給出DNA的起始濃度（copies/ul），實現(xiàn)真正意義上的絕對定量。

Ÿ   實驗結(jié)果判斷有和無兩種擴增狀態(tài)，不依賴于擴增效率，對PCR反應(yīng)抑制物的耐受能力明顯提高。

Ÿ   反應(yīng)體系微滴化可以極大的降低與目標(biāo)序列有競爭性作用的背景序列濃度，因此特別適合在復(fù)雜背景中檢測稀有突變（≥0.1%）、區(qū)分微小差異（≥1.1倍）。

樣本類型

適用樣本為組織樣本。

檢測結(jié)果示意圖

適應(yīng)癥：非小細胞肺癌

推薦用藥： 4-嘧啶二胺     色瑞替尼  塞瑞替尼　 克唑替尼　                                 

本試劑僅限科研使用